jinmin

本来想早早地睡下的，可洗漱间觉得心里很不舒服……他们都已经歇息了，除了触击键盘的声音，就是他们轻微的呼吸声。我在想，我的天空在哪里？知心，好友？为什么还总觉得孤单？想起我的哥哥，他还漂流在外。我答应有时间一定会给他打电话，可我还是没有打过，倒是他给我打过几次电话，他说怕耽误我时间所以没有多打。上一次给我打电话的时候他说他只有90多斤重，说自己身体很好……我只感觉泪水在眼里打转，我们有四年没有见面了，那时候他比我还要重，问我是不是胖了，我说我还是一百二，也挺好的。每次接完电话我就会想起我跟着他一起从小学到初中、高中上学的一幕幕，他一直都在保护着我、教导着我，他健壮的身体让我觉得在他身边就什么都不会害怕，我很喜欢他一副大哥的样子带着我。只是，这一切从此只能在美好的回忆里追寻了——哥哥，他认为他没有什么能够保护我的了。

哥哥！

时间就像是香烟头上的青烟，只有你闲下来的时候才能看到它轻轻地飘散。

当你用心去体会的时候，你才知道原来时间也有味道。

密密麻麻的质粒分子象一群活泼听话的孩子一样彼此推搡着、簇拥着，扭动着身躯，穿过充满孔隙的琼脂糖网络，向正端的电极泳动。负极的白金丝上咕咕咕地冒着快乐的气泡，形成一个帘子倒挂在水中。做一个质粒快乐地在电场里游动那多么美好啊！

昨天刚想在这里讲述了波波和苗苗的浪漫故事，今天啊波看见了那篇文章，没想到竟然要求我立即删除。我甚至有点生气他这无理的要求，为什么？我说既然敢爱，为什么还怕人看见？但他一直坚持他无理的要求，直到了最后，他才说了一句，一直以来都是他在主动，而不是我所写的“女生主动一点好”。我被深深的触动了。如此木讷的男生，内心深处却是如此细腻。虽然我没有了解他们之间发生的全部事情，但我明白啊波无论如何也不想别人认为是她主动。

他们的爱情来得这么浪漫，哈哈

女生主动一点还是可以的，爱情就是这样产生。恭喜啊波，好好珍惜！

GST融合蛋白的纯化

诱导和收集菌体

Ø         在一定的诱导条件下IPTG诱导蛋白的合成。18～25℃的低温条件下培养可以使大部分蛋白融合蛋白可溶性表达，并保持较高的活性。IPTG浓度一般为0.1～1.0mM。

Ø         5000rpm 5min离心收集菌体。

Ø         取存放谷胱甘肽琼脂糖的瓶子颠倒数次，使其混匀，取1.5ml混合液加入层析柱中，加10ml 20％乙醇，使琼脂糖在柱中自然沉降。

Ø         将20％乙醇流尽后，加10ml PBS清洗柱子，待管中PBS液面刚好没过凝胶时，套上滴口的套子，待用。

Ø         每100ml菌液的菌体用4ml PBS（加1％Triton-100、蛋白酶抑制剂）悬浮。

Ø         在冰水中超声波破碎细胞（1分钟/次×5次，每次间隔1分钟）。

Ø         将裂解液分装至小管，4℃ 10000rpm离心5分钟。

Ø         收集上清液，加DTT至终浓度为1mM。

Ø         室温下使混合液自然通过层析柱，保留0.5ml过滤液做PAGE电泳检测用。

Ø         用10ml PBS洗柱子3遍，每次临近结束时收集洗涤液0.5ml测OD值。

Ø         配制10mM的还原型谷胱甘肽溶液，即洗脱液3ml（ 0.009g溶于3ml 50mM Tris-Cl溶液中）。

Ø         用洗脱液洗脱GST融合蛋白，每管0.5ml接收洗脱液。

Ø         测各管洗脱液蛋白浓度。

Ø         PAGE电泳检测纯度。

亲和层析柱的再生：用0.04M NaOH洗10ml×3次，用10ml PBS平衡后，加20％乙醇储存于4度。或者按照beads使用说明书上的方法再生。

l             如果洗脱液中的还原型谷胱甘肽对实验有影响时，需用分子筛去除。

l             如果需要不带标签的蛋白，则蛋白被柱子吸附后，用蛋白酶进行切割；或者用分子筛过滤后，在筛子上进行酶切。

6：45～60起床

7：00～7：10出门

四个学一小包子，一碗绿豆粥

7：30～8：00到实验室 一天实验开始……

站着、坐着、趴着、蹲着、靠着、走着、单脚站、换一只脚站、来回走……

晚11：00 可以回去了，关灯锁门

11：10 爬四层楼 进屋 坐 脱鞋袜  双腿酸胀、筋疲力尽

11：40 洗漱

        bbs bt sports news pubmed microtubule binding protein

01：00 睡

……只闻呼噜声

非常非常地郁闷

什么都不想做了

天天对着瓶瓶罐罐

厌倦了试剂的加来加去

实验的反反复复

失败没有尽头

唉～

在二手市场买了一台电脑以后，就开始琢磨怎样在宿舍登录实验室的机器。在实验室各位兄弟的共同努力下，已经实现了远程登录。但现在还有很多问题存在：

1、远程开机。 在宿舍登录实验室电脑之后，除了随心所欲地使用实验室电脑上的程序之外，还可以随时进行关机或重新启动（分别运行shutdown －s和shutdown －r）。但一旦关了机器，就再也无法登录了。在网上搜索有一种远程开机程序“远程唤醒”，但安装后也遇到了问题。因为实验室使用了路由器，多个电脑在路由器下构成一个小的局域网，这样远程唤醒所发送的开机命令就无法达到我的机器上，大家努力了好久也没有解决，还盼高手指教啊，要不以后实验室的电脑得一直开着了：（

2、安全问题。 只要破解了一个登录的密码，电脑就会任人摆布。怎样才能提高安全性呢？好像听说一种破解密码的方法是直接把密码从数据库里面读出来，这样再长再复杂的密码都没有用，不知是否真的如此？

3、文件传输。似乎只能在其中一台机器上安装ftp之类的软件才能实现。另外有文章介绍说两台机器可以共享剪贴板，还没有试过。

附：相关文章一篇

有人专门研究过人是怎样笑起来的——从接收外界信息，在脑部运算，最后发出指令，并协调各个相关肌肉的伸缩运动——人就笑起来了。人们通过笑获得了某种满足，得到某种享受，是一种很奇妙的感觉，并在很大程度上，人可以通过拥有这种享受而区别于许多生物。事实上很多动物都具有笑的能力，只不过它们的笑可能会比人类来得单纯一点。人在很多时候都会笑，开心的笑，幸福的笑，得意的笑，无奈的笑，痛苦的笑，狡诈的笑……人多少有控制笑的能力，也许这是人和动物之间笑的区别吧。用笑是人们处理社会关系的一个工具，而不会象动物一样只有真心愉悦的时候才笑一笑。而人真的能控制住自己的笑吗？

刘老师生病了，之前已经请了近一个学期的假，以为这一学期会回来了，可没想到又请了一个学期的假。真心的希望她能快点好起来。

以前她总是很忙，因为实验室新新建立，需要买很多仪器，有人要是办过类似的手续就会知道这里边可麻烦了，特别是进口的仪器，要到处跑腿。大多数情况下，她都是自己去办了，那时候我们还有课，另外也已经开始课题做实验了，所以很少有空替她跑腿。但刘老师从来也没说什么，过节了还会送盒糖果给我们吃。如果光办理这些事情的话，刘老师应该还能应付得过来。但实验室的每个人都要做实验，不管老师还是学生——除了做此规定的老板本人。刘老师天天都是要两头顾，有时候正在做着实验还会有搞仪器销售的人来谈，实验总是事倍功半甚至前功尽弃。每天也从早上8点一直忙到晚上5、6点，中午都没有回去休息。真觉得她太辛苦了。半年下来就把她累坏了，真心希望她能快点好起来，以后不会有那么多的活了。人多了，每个人都分担一点就好了。

发信人: dramaticlife (小亮:重出江湖), 信区: Joke
标 题: 小时侯傻傻的自己—VON上的妙答：）
发信站: 我爱南开站 (2006年09月06日13:11:19 星期三)

发信人: Magee (Magee), 信区: VoiceofNankai
标 题: 大家都来说说，小时候自己最傻的想法？
发信站: 我爱南开站 (2006年09月06日09:53:49 星期三)
我就先来了：
记得小时候，父亲老是哪一个问题考我。什么问题呢——“一斤铁重，还
是一斤棉花中？”那时候的我，总是毫不犹豫地说“当然铁重”，就没有
印象答对过，记得到了初中的某一天，忽然想明白了。呵呵，够傻的。


还有一个就是，那个时候学生物嘛，老师告诉我们人的肌肉是XX块，男女
都一样，我就不明白了，怎么会一样呢？男的明明比女的多的嘛，因为男
的的小dd不是肌肉吗？那时候不知道原理，总认为能收缩的就是肌肉了。
呵呵
--

以下是大家的精彩回帖：

05年的时候从南开BT上下载过一些超级女声的节目看，一开始就比较喜欢zly，讨厌lyc。但晋级过程中lyc迟迟没有被淘汰让我觉得非常郁闷，后来就再没接着看了。网络上铺天盖地的lyc让人恶心得不得了，垃圾！

垃圾节目造就了垃圾超女，听听她们的超声，你身上的毛孔要是还能安静地自由地呼吸，这个世界就不会有恶心死你的东西。mms://222.185.225.103/ent/2006/sg/8r8c0901.wmv

说实在的，我自己之所以要写博客并不是有什么值得纪念的，而是要找一个发泄的地方。但往往发泄了之后，回头再看看文字，却也是很有纪念意义的。人的记忆力永远是那么有限，很多事情随着时间的推移也就在脑海里慢慢地淡化、消失，但同时又有新的事物储存下来，如此往复……我们的人生也就是经历着这样的一幕幕，并在脑海里一个接着一个地闪过……想着想着，发现自己已经老了。人生不就是老者谢幕时脑海里浮过的一幕幕吗。如果能写一段文字，那就是给自己的人生的幻灯片添加了一帧。

很小的时候就想过自己突然一天就会很老，就要死去。那时真的很害怕，害怕那种一夜之间变成老人、要面对死亡，而那无忧无虑的快乐童年似乎才是昨天。这种跨越了中间几十年的感想让人无所适从。应为那时候还小，只知道童年的快乐，正享受着生命赋予的快乐，对面前的一切都期待着去了解，怎么能舍得疼爱自己的父母亲？怎么能舍得这个世界呢？长大了，对这个世界不再有那么强的好奇心了，也懒得去探个究竟了，这时候能够稍微理解人为何能够安然地死去了，也许是真的厌倦了，那真的是一种解脱。所以慢慢地并不再惧怕死亡，这时候可以安静地思考生与死是怎么回事……

学校里的学习生活很忙，以至于回家是一件很浪费时间很奢侈的事情。但大家都说了，不管怎样都要经常回家看看的。于是我决定这个暑假回家了，但原因其实是我想回去看看一个人。

终于决定要回去了，这个在实验室和宿舍内引起了不小的轰动。

一直以来，就只是往笼子里放了一堆鼠食和一瓶水，然后就几乎什么也不管了。只是每个周一把它们取出来往腹部皮下注射了100微升的抗原，然后再把它们放回笼子里去。偶尔去看看笼子的时候，它们总是在木屑里刨个坑，蜷缩在一起。我很少会逗它们玩，只是看看鼠食有没有、能不能够得着喝水……我并不是不喜欢小动物，只是我知道这些小鼠的命运如何，我不想和它们有任何的感情。

原本觉得一切都会平静地结束的，但一天早晨实验室来了一位不速之客。它可能原先就嗅到了早餐的美味，早早地就穿了进去。我那天去得很早，打开实验室的门，太阳已暖暖地晒在地板上，如往常一样静悄悄的。刚走过两步，猛地发现脚下有长长的东西突然动起来，全身寒毛猛地一震，正在跨着的脚没敢落地就赶紧蹿了过去，回身一看，吓得后退了几步。

e ge pi bomn duo pi ^_^

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